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(资料图)
噬菌体展示技术是一种快速、低成本、高通量的多肽抗原筛选方法。从上世纪80年代被发明开始，已成为抗体发现的主流技术平台之一。该技术是将外源多肽或蛋白质DNA插入到噬菌体外壳蛋白的结构基因的适当位置上，外壳蛋白表达后，能直接在噬菌体表面表达出来，从而直接将基因型和表现型联系起来。该技术可以针对所有靶点开展筛选，包括免疫原性较弱的靶点。
噬菌体展示在抗体药物发现中有着广泛的应用。它可以促进治疗靶点的肽配体的识别，为药物发现工作提供一个出发点，同时它也是理解这些生物分子如何与其他蛋白质发生交叉反应的关键。专注于开发抗体药物的研究小组使用噬菌体展示来研究抗体的选择性，同时该技术也可用于识别适合靶向向肿瘤传递细胞毒素的scFv片段。
步骤一：噬菌体抗体库的构建
库容和多样性是评价噬菌体抗体文库质量的 2 个重要指标，库容大、多样性高的抗体文库才能方便、快捷地筛选出低抗原性、高亲和性等生物学活性的优质抗体。高质量的抗体文库，是筛选出高亲和力、高特异性抗体的保证。
需要考虑的关键问题包括：膜蛋白的选择和改造、噬菌粒的元件选择、CDR区域与backbone/P3区域的DNA同源性问题、宿主菌选择/基因组改造、helper phage选择等。另外，抗体库的类型不同，对应的技术要求也有很多区别。例如天然抗体库构建时Donors的选择、VH/VK亚型的选择等；免疫抗体库构建时抗原结构分析与免疫策略设计、羊驼/骆驼VH的扩增等；全合成抗体库构建时突变模板的选择、引物设计和突变方法等。
步骤二：抗体筛选
抗体库的筛选流程主要有抗原结构分析与制备、生物淘筛、阳性克隆鉴定三个环节。具体细节包括筛选用抗原的选择，不同类型抗原（蛋白、细胞）的淘筛流程，不同筛选策略（竞争性筛选）的注意要点以及NGS技术的辅助应用经验。
步骤三：测序、表达及纯化、QC 检测等
这一步骤主要涉及的是抗体工程改造的应用，如何确保最终获得的高质量的目的抗体？普健生物噬菌体展示抗体发现技术平台拥有丰厚的技术积累和沉淀，基于严苛的QC检测，可确保总插入率及正确率——片段插入率 100%，抗体序列正确率 >90%；具备抗体序列多样性分析如种系基因（Germline）分析、互补决定区（CDR）分析等。
噬菌体展示技术目广泛应用于研制类风湿性关节炎、牛皮藓和炎症性肠病等抗体药（比如：阿达木单抗）发现，我们可以预见，随着生命科学领域研究的深入，噬菌体展示技术在未来的药物研发中将会继续大放异彩。
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